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    Product center

    磷酸化修飾

    磷酸化修飾

    磷酸化作用-多肽修飾

      磷酸化影響著細胞生命的方方面面。蛋白激酶通過調節信號通路和細胞進程,影響胞內通信功能的每一方面。然而異常的磷酸化也是引起諸多疾病的起因。尤其是突變的蛋白激酶、磷酸酶可導致許多紊亂。很多天然毒素和病原體也是通過改變胞內蛋白的磷酸化狀態來發揮它們的影響。


      絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)的磷酸化作用是一個可逆的蛋白修飾過程,它們參與調節無數的細胞活動,如受體信號轉導、蛋白質締合與分割、激活或抑制蛋白功能,甚至細胞的存活等。磷酸鹽是帶負電的(每一個磷酸基攜帶兩個負電荷)。因此,他們的加入會改變蛋白屬性,這種變化通常是構象變化,引起蛋白質改變它的構造方式。當磷酸基團被去除時,蛋白質構象又會恢復至原始狀態。如果這兩種構象的蛋白質表現出不同的活性,那磷酸化可以作為此蛋白控制其活性的分子開關。

      許多激素均是通過提高絲氨酸(Ser)或蘇氨酸(Thr)殘基的磷酸化狀態來調節特異性酶的活性。生長因子(如胰島素)可以觸發酪氨酸(Tyr)的磷酸化作用。這些氨基酸的磷酸基團是可以迅速地被去掉的,因此,Ser、Thr和Tyr的功能在調控細胞活動的過程(如腫瘤擴散)中起到分子開關的作用。

       合成肽在研究蛋白激酶底物以及相互作用的領域起著非常有用的作用。但目前一些因素阻礙或限制了磷酸化多肽合成技術的適應性,如無法實現固相合成全自動化、缺乏與標準分析平臺之間的便利連接等。合生生工基于PeptideSynTM 平臺的多肽合成及磷酸化修飾技術克服了這些限制,同時提高了的合成效率也顯示了它的可擴展性。PeptideSynTM 平臺非常適合于蛋白激酶底物、抗原、結合分子和抑制劑的研究。

     

    采用高品質的Fmoc-Thr(HPO3Bzl)-OH, Fmoc-Tyr(HPO3Bzl)-OH, Fmoc-Ser(HPO3Bzl)-OH 等原料,采用Fmoc固相合成工藝,合成Thr,Tyr,Ser磷酸化多肽,使用HPLC 對產物進行純化。最終產品提供相應的質譜圖,純度分析的HPLC 色譜圖,及COA。

    L型磷酸化修飾  

    Thr(HPO3)

    Tyr(HPO3)

    Ser(HPO3)

           pT

    pY      

     pS

    蘇氨酸磷酸化

    酪氨酸磷酸化

      絲氨酸磷酸化

    D型磷酸化修飾 

    D-Thr(HPO3)

    D-Tyr(HPO3)

    D-Ser(HPO3) 

    p(D-T)

    p(D-Y)  

    p(D-S)

    蘇氨酸磷酸化

    酪氨酸磷酸化

      絲氨酸磷酸化

    雙磷酸化修飾

    一個序列中有兩個Thr,Tyr,Ser 位點進行磷酸化修飾

    多磷酸化修飾

    一個序列中有兩個Thr,Tyr,Ser 位點進行磷酸化修飾

    我們提供pSer、pTyr、pThr和D-pSer、D-pTyr、D-pThr的磷酸化修飾服務。

    可同時進行2個位點、3個位點、4個位點、5個位點的磷酸化修飾。

    磷酸化多肽合成案例(Thr(HPO3)、Tyr(HPO3)、Ser(HPO3) 等)

    序列中有4個磷酸化位點(xxxpSpTxxxpSxxxpTx),純度為95%,完成周期為3周。

    HPLC分析:

    磷酸化修飾(圖1)

    MS圖譜:

    磷酸化修飾(圖2)


     


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